昆明PCR實驗室設計核心問題
admin 2020-07-21 05:28:56 閱讀
PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染 實驗室空調通風系統(tǒng)設計及壓力控制 標本制備區(qū) 擴增反應混合物配制和擴增區(qū) 擴增產物分析區(qū)
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求
該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區(qū),不得經過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內,并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。
該區(qū)域主要進行的操作為樣本的保存
標本制備區(qū) 擴增反應混合物配制和擴增區(qū) 緩 沖 區(qū) 傳遞窗
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區(qū)內不必要的走動。
該區(qū)域主要進行的操作為DNA擴增
本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行
該區(qū)域主要進行的操作為擴增片段的測定
本區(qū)是最主要的擴增產物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。