廣安PCR實驗室裝修要求




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2020-07-15 04:41:43
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PCR<a href="http://m.36game.net">實驗室裝修</a>要求PCR實驗室裝修要求

                    1 
、PCR實驗室平面布局 
      PCR擴(kuò)增檢驗實驗室原則上分為四個單獨(dú)的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
。為避免交叉污染
，進(jìn)入各個工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行
，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
。 各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。
2
、實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制 
      PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求
，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式
。同時
，要嚴(yán)格控制送
、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。 
2.1
、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
     該實驗區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備
、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)
，不得經(jīng)過其他區(qū)域
。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑
。 對與氣流壓力的控制
，本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。 
2.2
、標(biāo)本制備區(qū) 
     該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存
、核酸(RNA
、DNA)提取
、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成。 本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓
，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染
。另外
，由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動
。 
2.3、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 
     該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA擴(kuò)增
。此外
，已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。 本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓
，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出
。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動
。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行
。 
2.4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 
     該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定
。 本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源
，因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域
。
3
、污染的預(yù)防與控制 
       PCR實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中
，常見的有以下幾種污染類型：擴(kuò)增產(chǎn)物的污染
；天然基因組DNA的污染
；試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染
，實驗就必須停止
，直到找到污染源為止，而且實驗結(jié)果必須作廢
，需重新進(jìn)行實驗
。所以發(fā)生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣，浪費(fèi)人力物力
。因此要避免污染
，首先應(yīng)是預(yù)防，而不是排除
。
3.1
、工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分 
     （1）各個實驗區(qū)域設(shè)置合理； 
	     （2）各個實驗區(qū)域要有明顯的標(biāo)記（如醒目的門牌或不同的地面顏色等）
  ，以避免各個不同實驗區(qū)域設(shè)備物品
  、試劑等發(fā)生混淆。 
	
3.2
  、合理的系統(tǒng)設(shè)置 
    （1）合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置
  ，盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng)； 
    （2）嚴(yán)格的氣流壓力控制
  ，保證不同的實驗區(qū)內(nèi)不同的壓力要求
  。 
3.3、 規(guī)范的操作 
    （1）擴(kuò)增檢驗實驗室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn)
  ，經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗的工作
  ； 
    （2）在實驗操作過程中，操作者必須戴手套
  ，并經(jīng)常更換
  。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施
  ； 
    （3）清潔工作及時
  、正確。實驗工作結(jié)束后
  ，必須立即對本區(qū)進(jìn)行清潔
  。除常規(guī)的消毒液體對表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理
。 
3.4
、嚴(yán)格的管理 
    （1）嚴(yán)格控制進(jìn)出實驗室的人員。與實驗無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實驗室
，有條件的情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個實驗區(qū)的門
； 
    （2）盡量減少在實驗區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性
。 
    （3）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒
，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實驗室的地方棄掉
，用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等
； 
    （4）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)
，應(yīng)特別注意實驗人員的安全防護(hù)。 
3.5
、完備的實驗室配套設(shè)施 
	     完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件
，應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺
、離心機(jī)
、加樣器等。
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