宜賓PCR實(shí)驗(yàn)室裝修要求
admin
2020-07-15 04:41:43
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PCR實(shí)驗(yàn)室裝修要求PCR
實(shí)驗(yàn)室裝修要求
1
、
PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局 PCR擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染
,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行
,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。 各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行
。
2
、實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性
,宜采用全送全排的氣流組織形式
。同時(shí),要嚴(yán)格控制送
、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求
。
2.1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備
、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備
。試劑和用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域
。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)
,并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制
,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求
。
2.2、標(biāo)本制備區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為樣本的保存
、核酸(RNA、DNA)提取
、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成
。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染
。另外
,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)
。
2.3
、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA擴(kuò)增。此外
,已制備的DNA模板 (來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行
。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出
。為避免氣溶膠所致的污染
,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
2.4
、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定
。 本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓
,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域
。
3、污染的預(yù)防與控制
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染
。在實(shí)際工作中
,常見的有以下幾種污染類型:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染
;試劑的污染以及標(biāo)本間的污染
。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗(yàn)就必須停止
,直到找到污染源為止
,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí)驗(yàn)室來尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣
,浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染
,首先應(yīng)是預(yù)防
,而不是排除。
3.1
、工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分
(1)各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)置合理
;
(2)各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域要有明顯的標(biāo)記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等),以避免各個(gè)不同實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)備物品
、試劑等發(fā)生混淆
。
3.2、合理的系統(tǒng)設(shè)置
(1)合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置
,盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng)
;
(2)嚴(yán)格的氣流壓力控制,保證不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不同的壓力要求
。
3.3
、 規(guī)范的操作
(1)擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的工作
;
(2)在實(shí)驗(yàn)操作過程中
,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換
。此外
,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施;
(3)清潔工作及時(shí)、正確
。實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后
,必須立即對本區(qū)進(jìn)行清潔。除常規(guī)的消毒液體對表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外
,對一些實(shí)驗(yàn)設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理
。
3.4、嚴(yán)格的管理
(1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員
。與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室
,有條件的情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門;
(2)盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性
。
(3)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源
,廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒,必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉
,用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理
,如焚燒等;
(4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)
,應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)
。
3.5、完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施
完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件
,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器
,如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)
、加樣器等
。
以上為本公司整理提供,實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)
、建設(shè)
、裝修、改造
、通風(fēng)、凈化
、水電氣
、三廢處理,實(shí)驗(yàn)室家具設(shè)計(jì)生產(chǎn)安裝一站式
。更多實(shí)驗(yàn)室資訊
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