自貢GMP無菌實驗室的運行及管理




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2020-04-30 05:49:01
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	GMP無菌實驗室的運行及管理
	
　　一
、室內(nèi)環(huán)境管理(guǎn lǐ)
無菌實驗室設有無菌操作間、緩沖間和更衣間
，無菌操作間潔凈度達到10000級
，超凈臺潔凈度達到100級且室內(nèi)溫度應保持在20~24℃
，濕度保持在45%~60%[1]，此設置不僅滿足人體舒適度且又不利于室內(nèi)微生物的生存
。PCR實驗室結構和設施、安全操作規(guī)程
  、安全設備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物，如用于教學的普通微生物實驗室等
  。初效
  、中效過濾器需要6個月更換1次，高效過濾器需要每年更換1次
  ，以保證室內(nèi)潔凈度達到標準
  。紫外燈達到使用壽命(lifetime)會影響消毒滅菌的效果
  ，應定期巡查更換
  ，同時應加強其他指標的監(jiān)測，如潔凈度
  、細菌菌落數(shù)、靜壓差和風量等
  。

　　二
  、物流管理
經(jīng)過γ射線滅菌的細胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿
  、移液管、離心管等用1000mg/L濃度的消毒液徹底擦拭器材表面
，消毒后放置于傳遞窗中
，紫外燈照射30min后方可帶入實驗室。PCR實驗室國家實驗室代表國家最高水平
，是按國際一流標準建立的
，規(guī)模非常大
，基本包括本學科領域所有研究方向
，而且人員配備上要求面向國內(nèi)外招聘最優(yōu)秀的研究人員
，直接參與國際競爭
，往往是多學科交叉的創(chuàng)新平臺。高壓消毒的器材如止血鉗
、治療盤
、離心套管等要用包布包裹2層
，經(jīng)高壓蒸汽滅菌和烤箱烘干后使用。使用前應檢查物品包裹內(nèi)外各種監(jiān)測指示劑是否符合要求
，再決定使用
。貯存器材可放入無菌室的柜櫥內(nèi)
，若超過有效期應重新滅菌。進包裝間要嚴格洗手
，穿工作衣
、戴口罩、帽子
，包裝前檢查包布
  、治療巾，應清潔干燥無破損
  ，做到一用一洗一消毒
  ，各類器材應光潔無銹、性能完好齊全
  。
外用3M化學指示膠帶封貼并注明品名
  、包裝者、查對者
  、滅菌期及有效使用期
  ，各類滅菌包包扎應松緊適度、整齊
  ，減少各種感染的機會。所有實驗室器材需在最外層傳遞窗中用紫外燈照射30min后方可帶入緩沖間
  。滅菌包需在緩沖間內(nèi)剝?nèi)プ钔鈱影己蠓娇蓭霟o菌操作間。在無菌操作間內(nèi)剝?nèi)?nèi)層包布后擺放到固定(fixed)位置備用
  。實驗室內(nèi)各種器材要排放有序
  ，定期檢查，補充基數(shù)
  。為保證潔凈度
，應嚴禁堆放雜物，以防污染
。污敷料及垃圾廢液等應分別放入專用廢液缸和污物桶中
，待操作完畢后移出實驗室。徹底清潔室內(nèi)物品及地面
，減少污物在室內(nèi)的停留時間。

	  對已污染或疑似污染培養(yǎng)基
、細胞因子等應立即丟棄
。動物（SPF級）實驗室每類生物安全防護實驗室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級。各級實驗室的生物安全防護要求依次為：一級最低
，四級最高
。實驗室設定了單獨的陽性工作區(qū)域
，包括陽性無菌(意思：沒有活菌)操作間
、緩沖間和更衣間。陽性工作區(qū)域與陰性工作區(qū)域完全隔離
，防止肝炎病毒通過血液及相關物品等感染陰性患者回輸?shù)募毎?div   id="4qifd00"   class="flower right">
，防止患者通過細胞回輸感染乙肝病毒
。工作人員進入陽性區(qū)域后
，不得再進入陰性區(qū)域，陽性間每次使用的洗手衣需加入1000mg/L濃度消毒液
，洗滌晾干以備下次使用，每次進入陽性間所著一次性隔離衣在用后應棄于陽性間垃圾袋中
，陽性液體污物應瓶裝密封后放入陽性間醫(yī)療垃圾袋中
。陽性醫(yī)療垃圾袋從陽性間的傳遞窗中傳出，放入專用醫(yī)療垃圾桶中
，由院內(nèi)專人負責回收
。
	

　　三
、運行制度管理
工作人員于每次實驗操作前30min打開實驗室空氣凈化系統(tǒng)和紫外燈
  。如果實驗室長期不用
，需要在實驗前3h打開空氣凈化系統(tǒng)
，以提高空氣潔凈度。在潮濕季節(jié)使用時
，打開紫外燈時間需適當延長
，以加強消毒效果，保證實驗質(zhì)量
。進入無菌實驗室的人員要嚴格著裝
，穿著經(jīng)嚴格高壓蒸汽滅菌過的洗手衣
、隔離衣
、口罩、帽子及用10g/L過氧乙酸溶液浸泡后晾干的拖鞋
。著裝程序如下：進入第一更衣間后脫掉外衣?lián)Q一更拖鞋;隨即進入第二更衣間
，穿戴經(jīng)高壓蒸汽滅菌的一次性口罩帽子，著洗手衣?lián)Q二更拖鞋
，帶無菌橡膠手套;進入第三更衣間后著隔離服
，換三更拖鞋，之后方可進入無菌操作間操作
。
保持實驗室相對密閉狀態(tài)
，嚴格控制人員進出，必要情況下需要工作人員互相溝通協(xié)調(diào)時
，可通過房間對講電話聯(lián)絡
，將工作人員出入次數(shù)降到最低
，減少不必要的渦流形成，使室內(nèi)的氣壓始終處于正壓狀態(tài)
。各項操作要集中，操作過程要輕穩(wěn)
，不能在實驗室抖動衣物布類
，以防止微粒在室間飛揚，保證室間空氣的潔凈
。實驗室人員進入無菌（fungus)操作間應衣帽整潔、修剪指甲
，嚴格執(zhí)行無菌技術操作
。一切操作必須在百級凈化的超凈工作臺內(nèi)進行
，超凈工作臺在使用前需打開其紫外燈輻照滅菌30min以上
，并同時打開超凈工作臺進行吹風。實驗中應保持無菌操作
，拿取物品不要跨過無菌面;培養(yǎng)瓶不要過早打開
，對于已開瓶口者要盡量避免垂直放置;吸管等不能觸及瓶口，以防細菌污染或細胞的交叉感染
。每次操作過程中留取定量樣品進行細菌
、真菌、支原體檢測(檢查并測試)
，以檢查無菌操作的可靠性及細胞是否污染
。操作完畢后應及時清理無菌實驗室
。組織實驗室全體人員進行理論學習
，明確無菌實驗室工作原理、環(huán)境要求
，設置嚴格的工作流程
，明確分工并強化責任技師有效的合作配合意識。

　　四
、衛(wèi)生清潔管理
清潔工作應在實驗室空氣凈化系統(tǒng)(system)運行中進行，清潔工具采用不掉纖維的織物材料制作
。一切清潔工作必須采用濕式打掃
，每周進行1次徹底清潔。需用1000mg/L含氯消毒液擦拭房間桌
、椅
、墻壁
、天花板以及轉凳
、顯微鏡等固定在實驗室內(nèi)的物體。用體積分數(shù)為75%的酒精擦拭培養(yǎng)箱
、超凈臺和紫外線燈管
。地板很容易藏塵(如人體皮膚、毛發(fā)的脫落
、布類的纖維等)
、藏菌等，是室內(nèi)的污染源
，應在吸塵器吸除后用1000mg/L含氯消毒液擦拭
。抽風、回風口也易藏塵
、藏菌，應重點(zhòng diǎn)拆洗清潔
，以確保塵埃過濾效果。衛(wèi)生清潔時應用10g/L過氧乙酸溶液浸泡消毒工作人員所穿的拖鞋，待晾干后再使用
。每周進行徹底清潔時應將實驗室內(nèi)物品如移液器
、移液器槍頭、止血鉗
、治療盤(蕁蕁上接第76頁蕁蕁)以及離心機套管等進行高壓蒸汽滅菌
。清潔工作完成后，手術室凈化系統(tǒng)繼續(xù)運行時間一般不應少于30min
。
【二級施工資質(zhì)】實驗室設計
、建設、裝修