云南GMP無菌實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行及管理




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2020-04-30 05:49:01
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	GMP無菌實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行及管理
	
　　一、室內(nèi)環(huán)境管理(guǎn lǐ)
無菌實(shí)驗(yàn)室設(shè)有無菌操作間
  、緩沖間和更衣間，無菌操作間潔凈度達(dá)到10000級
  ，超凈臺潔凈度達(dá)到100級且室內(nèi)溫度應(yīng)保持在20~24℃，濕度保持在45%~60%[1]
  ，此設(shè)置不僅滿足人體舒適度且又不利于室內(nèi)微生物的生存
  。PCR實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程
  、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物
  ，如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。初效
、中效過濾器需要6個月更換1次
，高效過濾器需要每年更換1次
，以保證室內(nèi)潔凈度達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)
。紫外燈達(dá)到使用壽命(lifetime)會影響消毒滅菌的效果，應(yīng)定期巡查更換
，同時應(yīng)加強(qiáng)其他指標(biāo)的監(jiān)測
，如潔凈度
、細(xì)菌菌落數(shù)、靜壓差和風(fēng)量等
。

　　二
、物流管理
經(jīng)過γ射線滅菌的細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿
、移液管
、離心管等用1000mg/L濃度的消毒液徹底擦拭器材表面，消毒后放置于傳遞窗中
，紫外燈照射30min后方可帶入實(shí)驗(yàn)室
。PCR實(shí)驗(yàn)室國家實(shí)驗(yàn)室代表國家最高水平，是按國際一流標(biāo)準(zhǔn)建立的
，規(guī)模非常大
，基本包括本學(xué)科領(lǐng)域所有研究方向，而且人員配備上要求面向國內(nèi)外招聘最優(yōu)秀的研究人員
，直接參與國際競爭
，往往是多學(xué)科交叉的創(chuàng)新平臺。高壓消毒的器材如止血鉗
、治療盤
、離心套管等要用包布包裹2層，經(jīng)高壓蒸汽滅菌和烤箱烘干后使用
。使用前應(yīng)檢查物品包裹內(nèi)外各種監(jiān)測指示劑是否符合要求
  ，再決定使用。貯存器材可放入無菌室的柜櫥內(nèi)
  ，若超過有效期應(yīng)重新滅菌
  。進(jìn)包裝間要嚴(yán)格洗手，穿工作衣
  、戴口罩
  、帽子，包裝前檢查包布
  、治療巾
  ，應(yīng)清潔干燥無破損，做到一用一洗一消毒
  ，各類器材應(yīng)光潔無銹
  、性能完好齊全。
外用3M化學(xué)指示膠帶封貼并注明品名
、包裝者
、查對者、滅菌期及有效使用期，各類滅菌包包扎應(yīng)松緊適度
、整齊
，減少各種感染的機(jī)會。所有實(shí)驗(yàn)室器材需在最外層傳遞窗中用紫外燈照射30min后方可帶入緩沖間
。滅菌包需在緩沖間內(nèi)剝?nèi)プ钔鈱影己蠓娇蓭霟o菌操作間
。在無菌操作間內(nèi)剝?nèi)?nèi)層包布后擺放到固定(fixed)位置備用。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各種器材要排放有序
，定期檢查
，補(bǔ)充基數(shù)。為保證潔凈度
，應(yīng)嚴(yán)禁堆放雜物
，以防污染。污敷料及垃圾廢液等應(yīng)分別放入專用廢液缸和污物桶中
，待操作完畢后移出實(shí)驗(yàn)室
。徹底清潔室內(nèi)物品及地面，減少污物在室內(nèi)的停留時間
。

	  對已污染或疑似污染培養(yǎng)基
、細(xì)胞因子等應(yīng)立即丟棄。動物（SPF級）實(shí)驗(yàn)室每類生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級
。各級實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求依次為：一級最低
，四級最高。實(shí)驗(yàn)室設(shè)定了單獨(dú)的陽性工作區(qū)域
，包括陽性無菌(意思：沒有活菌)操作間
、緩沖間和更衣間。陽性工作區(qū)域與陰性工作區(qū)域完全隔離
，防止肝炎病毒通過血液及相關(guān)物品等感染陰性患者回輸?shù)募?xì)胞
，防止患者通過細(xì)胞回輸感染乙肝病毒。工作人員進(jìn)入陽性區(qū)域后
，不得再進(jìn)入陰性區(qū)域
，陽性間每次使用的洗手衣需加入1000mg/L濃度消毒液，洗滌晾干以備下次使用
，每次進(jìn)入陽性間所著一次性隔離衣在用后應(yīng)棄于陽性間垃圾袋中
，陽性液體污物應(yīng)瓶裝密封后放入陽性間醫(yī)療垃圾袋中。陽性醫(yī)療垃圾袋從陽性間的傳遞窗中傳出
，放入專用醫(yī)療垃圾桶中
，由院內(nèi)專人負(fù)責(zé)回收。
	

　　三
、運(yùn)行制度管理
工作人員于每次實(shí)驗(yàn)操作前30min打開實(shí)驗(yàn)室空氣凈化系統(tǒng)和紫外燈
。如果實(shí)驗(yàn)室長期不用
，需要在實(shí)驗(yàn)前3h打開空氣凈化系統(tǒng)，以提高空氣潔凈度
。在潮濕季節(jié)使用時，打開紫外燈時間需適當(dāng)延長
，以加強(qiáng)消毒效果
，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。進(jìn)入無菌實(shí)驗(yàn)室的人員要嚴(yán)格著裝
，穿著經(jīng)嚴(yán)格高壓蒸汽滅菌過的洗手衣
、隔離衣、口罩
、帽子及用10g/L過氧乙酸溶液浸泡后晾干的拖鞋
。著裝程序如下：進(jìn)入第一更衣間后脫掉外衣?lián)Q一更拖鞋;隨即進(jìn)入第二更衣間，穿戴經(jīng)高壓蒸汽滅菌的一次性口罩帽子
，著洗手衣?lián)Q二更拖鞋
，帶無菌橡膠手套;進(jìn)入第三更衣間后著隔離服，換三更拖鞋
，之后方可進(jìn)入無菌操作間操作
。
保持實(shí)驗(yàn)室相對密閉狀態(tài)，嚴(yán)格控制人員進(jìn)出
，必要情況下需要工作人員互相溝通協(xié)調(diào)時
，可通過房間對講電話聯(lián)絡(luò)，將工作人員出入次數(shù)降到最低
，減少不必要的渦流形成
，使室內(nèi)的氣壓始終處于正壓狀態(tài)。各項(xiàng)操作要集中
，操作過程要輕穩(wěn)
，不能在實(shí)驗(yàn)室抖動衣物布類，以防止微粒在室間飛揚(yáng)
，保證室間空氣的潔凈
。實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入無菌（fungus)操作間應(yīng)衣帽整潔、修剪指甲
，嚴(yán)格執(zhí)行無菌技術(shù)操作
。一切操作必須在百級凈化的超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行，超凈工作臺在使用前需打開其紫外燈輻照滅菌30min以上
，并同時打開超凈工作臺進(jìn)行吹風(fēng)
。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)保持無菌操作，拿取物品不要跨過無菌面;培養(yǎng)瓶不要過早打開
，對于已開瓶口者要盡量避免垂直放置;吸管等不能觸及瓶口
，以防細(xì)菌污染或細(xì)胞的交叉感染
。每次操作過程中留取定量樣品進(jìn)行細(xì)菌、真菌
、支原體檢測(檢查并測試)
，以檢查無菌操作的可靠性及細(xì)胞是否污染。操作完畢后應(yīng)及時清理無菌實(shí)驗(yàn)室
。組織實(shí)驗(yàn)室全體人員進(jìn)行理論學(xué)習(xí)
，明確無菌實(shí)驗(yàn)室工作原理、環(huán)境要求
，設(shè)置嚴(yán)格的工作流程
，明確分工并強(qiáng)化責(zé)任技師有效的合作配合意識。

　　四
、衛(wèi)生清潔管理
清潔工作應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室空氣凈化系統(tǒng)(system)運(yùn)行中進(jìn)行
，清潔工具采用不掉纖維的織物材料制作。一切清潔工作必須采用濕式打掃
，每周進(jìn)行1次徹底清潔
。需用1000mg/L含氯消毒液擦拭房間桌、椅
、墻壁
、天花板以及轉(zhuǎn)凳、顯微鏡等固定在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的物體
。用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭培養(yǎng)箱
、超凈臺和紫外線燈管。地板很容易藏塵(如人體皮膚
、毛發(fā)的脫落
、布類的纖維等)、藏菌等
，是室內(nèi)的污染源
，應(yīng)在吸塵器吸除后用1000mg/L含氯消毒液擦拭。抽風(fēng)
、回風(fēng)口也易藏塵
、藏菌，應(yīng)重點(diǎn)(zhòng diǎn)拆洗清潔
，以確保塵埃過濾效果
。衛(wèi)生清潔時應(yīng)用10g/L過氧乙酸溶液浸泡消毒工作人員所穿的拖鞋，待晾干后再使用
。每周進(jìn)行徹底清潔時應(yīng)將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品如移液器
、移液器槍頭、止血鉗
、治療盤(蕁蕁上接第76頁蕁蕁)以及離心機(jī)套管等進(jìn)行高壓蒸汽滅菌
。清潔工作完成后
，手術(shù)室凈化系統(tǒng)繼續(xù)運(yùn)行時間一般不應(yīng)少于30min。
【二級施工資質(zhì)】實(shí)驗(yàn)室設(shè)計
、建設(shè)
、裝修、改造
、通風(fēng)
、凈化、水電氣
、三廢處理
，實(shí)驗(yàn)室家具設(shè)計生產(chǎn)安裝一站式
。