PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)基本要求
1 PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增
、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域
。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室
，有上述前面三個(gè)區(qū)域即可
。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔
，不應(yīng)有任何的空氣直通
。
2標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域（即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
，空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi)，可通過(guò)在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥
、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求
。
PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)工作區(qū)域，如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng)：則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)
、標(biāo)本制備區(qū)
、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域
，這是最常用的分區(qū)方式
。樣品需要粉碎處理的，還需增設(shè)樣品粉碎區(qū)
；若使用實(shí)時(shí)熒光PCR法：基因擴(kuò)增區(qū)
、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個(gè)房間內(nèi)；采用標(biāo)本處理
、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的全自動(dòng)化PCR分析儀
，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)
、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個(gè)區(qū)域
，因此PCR實(shí)驗(yàn)室原則上設(shè)置五個(gè)區(qū)或四個(gè)區(qū)或三個(gè)區(qū)或二個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)。
核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)可設(shè)在一個(gè)房間內(nèi)
，但必須在滿足下列要求的前提下：
a.核酸擴(kuò)增前區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置兩個(gè)不同位置的實(shí)驗(yàn)區(qū)
，試劑配置在超凈工作臺(tái)中操作，樣品處理在生物安全柜內(nèi)操作
。
b.在核酸擴(kuò)增后區(qū)使用全封閉的擴(kuò)增和檢測(cè)系統(tǒng)
，如實(shí)時(shí)熒光PCR儀等。
c.每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員使用各自的試劑
、耗材
、移液器和盛放污染物的盛器。
d.在實(shí)驗(yàn)前后對(duì)操作區(qū)域和共享器具進(jìn)行清潔及消毒
。
e.各區(qū)域的試劑
、器具、儀器和設(shè)備為該區(qū)專用
，不得交叉使用
。
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